一、BcMag™ TR-FRET检测体系

BcMag™ TR-FRET测定方法与传统的FRET（Förster共振能量转移）测定方法不同，它利用时间分辨荧光磁珠（BcMag™ TR-Magnetic Beads）作为荧光供体团。供体和受体可以是两个蛋白质、两个DNA链、抗原、抗体或配体或其它受体。在一定的时间延迟后（通常为50至100秒），当供体和受体分子靠近并以时间分辨方式进行监测时，通过荧光共振能量转移产生信号。在BcMag™ TR-FRET测定方法中，微量的分析物可以通过时间分辨磁珠轻松地从样品中富集，从而提高灵敏度。该测定方法消除了由样品和塑料微孔板引起的所有荧光背景影响，以及直接激发受体所产生的背景影响。因此，BcMag™ TR-FRET测定方法的信噪比非常高，背景值非常低。此外，该测定方法不需要清洗步骤。BcMag™ TR-FRET测定方法在高通量筛选的生物分析中具有显著的优势，如测定灵活性、可靠性、提高测定灵敏度、更高的通量和更少的假阳性/假阴性结果。

 

 

二、BcMag™ 铽/钌/铕 荧光磁珠特点

 

 

1  铕荧光团：是一种高效的时间分辨荧光标记，它在340nm处激发，发出615nm的红色荧光，具有长荧光寿命（730微秒）和较大的斯托克斯位移（275nm）。

2  铽荧光团：铽金属络合物荧光标记剂由于其独特的特性而成为高效的荧光标记剂。它在320nm处激发，并在545nm处发出绿色荧光，具有较长的荧光寿命（1050微秒）和较大的斯托克斯位移（220nm）。

3  钌荧光团：钌金属络合物在470nm处被激发，发射红色荧光（710nm），具有较长的荧光寿命（354.36 µsec）和较大的斯托克斯位移（175 nm）。

 

三、多样化的偶联基团

Bioclone提供预激活和预偶联的铽/钌/铕磁珠：您可以选择链霉亲和素、单体亲和素、蛋白A/G、蛋白G、蛋白A、蛋白L、醛基、氨基、羧基、酰肼基、N-羟基琥珀酰亚胺等基团。

 

四、工作原理与优势

工作原理▼

1. 将抗体偶联的供体磁珠与细胞裂解物混合，并在连续旋转中孵育足够长的时间。在混合过程中，磁珠保持悬浮在样品溶液中，使目标分析物能够结合到供体磁珠上。

2. 孵育后，使用磁性支架收集并分离磁珠与样品。

3. 添加抗体偶联的受体磁珠，并在连续旋转中孵育足够长的时间。

4. 进行TR-FRET测量的分析。

 

 

优势与特性▼

1. 同时在同一种磁珠上执行双重功能：磁珠结合了分离/富集和检测分析物的功能，允许在同一种磁珠上从复杂生物样品中快速、简便、可靠、高通量地检测微量分析物。

2. 超高灵敏度。检测限降低至<10 pg/mL，而典型的荧光检测限为100 pg/mL。

3. 极高的光稳定性和抗光漂白性。所有的镧系螯合物或隐蔽分子以及氧化铁完全封装在每个磁珠内部，而不仅仅位于磁珠表面。这种保护环境可以防止氧化铁和染料渗入水介质，使磁珠对溶剂、温度、pH等外部条件不敏感。

4. 非常高的荧光强度。因为单个磁珠含有高浓度的具有40至90%的高量子产率的镧系螯合物，所以磁珠显示出出色的荧光强度，可以增加测试的灵敏度，而无需信号放大。这种明亮的磁珠也非常适用于时间分辨FRET测定中供体的使用。

5. 镧系螯合物或隐蔽分子具有大的斯托克斯位移（>250 nm）、窄的发射带宽（-10 nm带宽）和长的荧光寿命（μs），大大减少了背景信号，增加了信噪比。

6. 大多数生物过程ELISA测定可以转换为HTRF测定。

7. 测定中不涉及洗涤步骤。

8. 具有亲水性的硅胶表面，可通过不同的功能基团和可变长度的连接剂进行修饰，允许高效地结合各种配体，如肽、蛋白质、抗体、小分子、碳水化合物、寡核苷酸/寡核苷酸、DNA/RNA等。

9. 由于微球的磁性特性，荧光磁珠非常适合于高通量自动化。

关于Bioclone

Bioclone Inc.（简称Bioclone、百隆生物）成立于2001年，是由科学家创立的生命科学公司，位于美国圣地亚哥。Biolcone以持续提供独特且前沿的产品给生命科学研究和临床诊断市场而闻名。Bioclone是全球科学家可信赖磁珠和感染性疾病相关重组蛋白供应商。

维百奥（北京）生物科技有限公司，作为Bioclone中国北方区授权代理商，持续将Bioclone公司特有的“一步法”DNA提取试剂盒、高品质功能性磁珠产品推向用户，目前用户已包括：中科院、清华大学、北京大学、中国计量科学研究院等知名院校和机构。