快速从血液中提取微生物DNA

 

从血液中分离微生物是临床微生物学中的一项基本实践，能够识别对患者护理至关重要的病原体。根据微生物负荷和目标，采用各种方法，包括血琼脂、离心、直接分离和亲和拉取。然而，传统的从血样中提取微生物DNA面临着低微生物浓度、污染风险、人类DNA占主导地位、细胞壁多样性、抑制性物质和多样化病原体等挑战。这些复杂性要求根据特定病原体特征量身定制精确的方法。一些方法涉及较长的处理时间（如微生物培养）、复杂的程序（过滤）或对极低微生物负荷（1-10 CFU/mL血液）的敏感性有限。

 

细菌在血液中的最低菌落形成单位（CFU）检测限制因方法和目标病原体而异。例如，双相法的检测限为1.2 CFU/mL，DNA分离法的检测限为10 CFU/mL，细菌DNA富集法的检测限也为10 CFU/mL。与传统的血培养技术相比，这些方法提供了更高的灵敏度，后者可以检测到每10 mL血液中的1 CFU。然而，它们可能存在与成本、复杂性、特异性和可用性相关的限制。

 

BcMag™简易血液微生物DNA提取试剂盒专门设计用于高效提取血样中的微生物DNA，同时确保没有人类DNA的污染。这个试剂盒采用了BcMag™微生物捕捉磁珠，这些磁珠以能够捕捉血样中常见的各种微生物而闻名。这些微生物包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、病毒和真菌，这些微生物在血样中经常遇到。提取过程非常简单，包括四个主要步骤：

1.除去宿主DNA：在这一初始步骤中，该试剂盒有效地去除宿主DNA，确保它不会干扰后续的微生物DNA分析。

2.磁珠捕捉：使用BcMag™微生物捕捉磁珠捕捉样本中的所有微生物，确保全面隔离。

3.微生物裂解：然后使用试剂盒提供的通用裂解缓冲液裂解隔离的微生物。这个裂解步骤高效，避免了需要耗时的技术，如珠磨碎、碱性裂解或使用刺激性化学品，这些方法都可能损害DNA完整性。该缓冲液温和，并且与下游应用兼容。

4.上清液收集：在裂解后，清洁的微生物DNA存在于上清液中。这个上清液可以轻松吸取，其中含有没有杂质的DNA，可以用于下游应用。

 

BcMag™简易血液微生物DNA提取试剂盒的主要特点包括：

1.避免宿主DNA干扰：该试剂盒确保宿主细胞DNA不会干扰微生物DNA的分析，提高了微生物DNA分析的准确性。

2.全面的微生物捕捉：独特的磁珠可以捕捉血样中发现的各种微生物，提供全面和全面的提取。

3.高效的微生物裂解：特制的下游兼容裂解缓冲液可以高效地分解微生物细胞，消除了需要耗时和刺激性方法的需要，同时保持DNA的完整性。

4.同时去除杂质：专有的磁珠不仅可以捕捉微生物，还可以在一步中去除PCR抑制物和细胞碎片。与传统的DNA纯化方法相比，后者涉及“结合-洗涤-洗脱”程序，这一显著提高了微生物检测灵敏度的技术的关键优势。

使用该试剂盒获得的纯化基因组DNA具有最高的完整性，可以用于微生物学研究和诊断中的各种下游应用。这个试剂盒提供了一种方便可靠的方法，可以从血样中分离微生物DNA，同时减小污染风险，确保提取的DNA的质量。