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革命性的Bioclone血液中微生物DNA快速提取技术!

人阅读 发布时间:2024-01-09 09:28

快速从血液中提取微生物DNA

 

从血液中分离微生物是临床微生物学中的一项基本实践,能够识别对患者护理至关重要的病原体。根据微生物负荷和目标,采用各种方法,包括血琼脂、离心、直接分离和亲和拉取。然而,传统的从血样中提取微生物DNA面临着低微生物浓度、污染风险、人类DNA占主导地位、细胞壁多样性、抑制性物质和多样化病原体等挑战。这些复杂性要求根据特定病原体特征量身定制精确的方法。一些方法涉及较长的处理时间(如微生物培养)、复杂的程序(过滤)或对极低微生物负荷(1-10 CFU/mL血液)的敏感性有限。

 

细菌在血液中的最低菌落形成单位(CFU)检测限制因方法和目标病原体而异。例如,双相法的检测限为1.2 CFU/mL,DNA分离法的检测限为10 CFU/mL,细菌DNA富集法的检测限也为10 CFU/mL。与传统的血培养技术相比,这些方法提供了更高的灵敏度,后者可以检测到每10 mL血液中的1 CFU。然而,它们可能存在与成本、复杂性、特异性和可用性相关的限制。

 

BcMag™简易血液微生物DNA提取试剂盒专门设计用于高效提取血样中的微生物DNA,同时确保没有人类DNA的污染。这个试剂盒采用了BcMag™微生物捕捉磁珠,这些磁珠以能够捕捉血样中常见的各种微生物而闻名。这些微生物包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、病毒和真菌,这些微生物在血样中经常遇到。提取过程非常简单,包括四个主要步骤:

1.除去宿主DNA:在这一初始步骤中,该试剂盒有效地去除宿主DNA,确保它不会干扰后续的微生物DNA分析。

2.磁珠捕捉:使用BcMag™微生物捕捉磁珠捕捉样本中的所有微生物,确保全面隔离。

3.微生物裂解:然后使用试剂盒提供的通用裂解缓冲液裂解隔离的微生物。这个裂解步骤高效,避免了需要耗时的技术,如珠磨碎、碱性裂解或使用刺激性化学品,这些方法都可能损害DNA完整性。该缓冲液温和,并且与下游应用兼容。

4.上清液收集:在裂解后,清洁的微生物DNA存在于上清液中。这个上清液可以轻松吸取,其中含有没有杂质的DNA,可以用于下游应用。


 

BcMag™简易血液微生物DNA提取试剂盒的主要特点包括:

1.避免宿主DNA干扰:该试剂盒确保宿主细胞DNA不会干扰微生物DNA的分析,提高了微生物DNA分析的准确性。

2.全面的微生物捕捉:独特的磁珠可以捕捉血样中发现的各种微生物,提供全面和全面的提取。

3.高效的微生物裂解:特制的下游兼容裂解缓冲液可以高效地分解微生物细胞,消除了需要耗时和刺激性方法的需要,同时保持DNA的完整性。

4.同时去除杂质:专有的磁珠不仅可以捕捉微生物,还可以在一步中去除PCR抑制物和细胞碎片。与传统的DNA纯化方法相比,后者涉及“结合-洗涤-洗脱”程序,这一显著提高了微生物检测灵敏度的技术的关键优势。

使用该试剂盒获得的纯化基因组DNA具有最高的完整性,可以用于微生物学研究和诊断中的各种下游应用。这个试剂盒提供了一种方便可靠的方法,可以从血样中分离微生物DNA,同时减小污染风险,确保提取的DNA的质量。

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